Electrophorèse capillaire avec détection conductimétrique sans contact

R. Nehmé de l’institut de chimie organique et analytique (ICOA) d’Orléans a présenté lors de la réunion du comité d’Ile de France de l’Afsep, la détection conductimétrique sans contact à couplage capacitif (C4D) en électrophorèse capillaire.

Ce détecteur permet d’analyser simultanément les cations et les anions, c’est à dire qu’il offre la possibilité de doser dans la même analyse le principe actif et son contre ion. Il est facile d’entrevoir un intérêt technique dans le développement des méthodes et un intérêt économique dans l’analyse en routine.

Trois exemples de dosages simultanés du PA et de son contre ion

Ce détecteur est composé de deux électrodes tubulaires formant un condensateur. Il peut se placer sur toute la longueur du capillaire à un endroit choisi en fonction des molécules recherchées. Il n’entraine  aucune modification du capillaire et permet donc de garder la détection habituelle (UV ou Fluo).

En utilisation simple il n’est plus nécessaire d’introduire un chromophore dans l’électrolyte ce qui améliore la sensibilité de l’analyse des ions inorganiques par rapport à la détection UV.

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La détection électrochimique coulométrique pour doser l’acide ascorbique dans le sang

Depuis plus de 70 ans, on sait que l’acide ascorbique est présent dans le sang total. Hélas les dosages spectrophotométriques de l’acide ascorbique dans les globules rouges sont difficiles à cause de multiples interférences. Or les enjeux de disposer d’une méthode de dosage fiable sont nombreux. Outre ses propriétés anti-oxydantes, cette molécule est soupçonnée d’être la cause d’accidents de transfusion. Ces accidents pourraient provenir de défaut de conservation du sang. Afin d’étudier la relation existante entre les lésions constatées sur les globules rouges et la concentration en acide ascorbique dans ces cellules, il était impératif de disposer d’une nouvelle méthode de dosage. Celle-ci devra pallier aux problèmes des anciennes méthodes : faible sensibilité, instabilité de la molécule d’acide ascorbique (oxydée en milieu aqueux), manque de spécificité, interférences avec d’autres composés présents dans le sang total.

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Colonnes core-shell : origine de leurs performances

F. Griffi et G. Guichon, qui se sont déjà intéressés aux différences d’efficacité entre les colonnes monolithiques et les colonnes core-shell (Post 16.03.12), ont présenté dans une interview pour LCGC (Chromatography online) leur dernière étude sur les mécanismes cinétiques des colonnes noyau dur, dont la publication est prévue en Juillet 2012.

En avant-première, ils annoncent que, selon leurs résultats expérimentaux, la présence de noyau dur entraîne une diminution de 25% du terme de diffusion longitudinale (B) et une diminution de 40% du coefficient de Eddy (A). Cependant F. Griffi n’explique pas le lien entre la diminution de la résistance de transfert de masse (C) et les performances obtenues dans l’analyse de petites molécules.
D’après eux,  d’un point de vue théorique, le gain en efficacité des particules à noyau dur n’a rien à voir avec le terme de transfert de masse (C), qui est pourtant un argument souvent mis en avant par les fournisseurs de colonnes core-shell. Ils expliquent également que, réduire le chemin de diffusion moyen dans les particules à noyau dur ne conduit pas nécessairement à une augmentation significative de l’efficacité pour l’analyse de petites molécules, mais que néanmoins cette amélioration des performances devient significative pour l’analyse de macromolécules supérieures à 10 kDa.
Leurs résultats convergent avec nos observations faites dans l’étude d’une macromolécule complexe de 3 kDa en UHPLC sur une colonne core-shell (Post 13.06.12).

C’est avec impatience que nous attendons la publication de cet article.

Challenging Beliefs About How Core-Shell Particles Work

Vérification des prédictions d’un logiciel d’optimisation de méthodes HPLC/UHPLC

Le logiciel Fusion Development méthode LC ™ est une application développée par S-Matrix™ et commercialisée par Waters™. Elle permet la réalisation d’optimisation de méthode de chromatographie à partir de la construction de plans d’expériences et du traitement des résultats obtenus lors de la mise en oeuvre de ces plans. Cette application est une évolution d’une plateforme de calcul déjà connue, adaptée à l’émergence de l’UHPLC et donc susceptible de travailler sur un nombre plus important de variables (Post 15.02.12).
Nous avons cherché ici à vérifier la qualité de prédiction du logiciel à partir d’une méthode simple et connue pour l’analyse en UHPLC de 7 conservateurs (benzoate, sorbate, alcool benzylique, méthylparaben, éthylparaben, propylparaben, et butylparaben).
Il s’agit, sur un large domaine expérimental, d’extraire des conditions d’analyse optimales et d’évaluer l’adéquation entre les paramètres (temps de rétention, résolution) prédits par Fusion™ et ceux mesurés lors de la mise en oeuvre de ces conditions.

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