Après le QDa™… le RDa™

Mis en avant

Le couplage de la chromatographie liquide à la spectrométrie de masse a connu une forte expansion ces dernières années grâce au développement de l’UHPLC. Elle est désormais couramment utilisée dans les développements de méthodes et même en contrôle de routine. Pour accompagner ce phénomène, après l’Acquity-QDa (détecteur quadripolaire de paillasse), Waters a décliné son concept sur la spectrométrie de masse à haute résolution avec le détecteur à temps de vol Acquity-RDa.

Ce détecteur de faible encombrement rend la spectrométrie de masse à haute résolution facilement accessible à toutes les étapes du cycle de vie d’une méthode pour les lesquelles la mesure de la masse unitaire (QDa) n’est pas suffisante.

Ce n’est pas seulement le cas lors de la création de la méthode mais également à l’étape de mise en production de la méthode pendant laquelle des déviations (apparitions ou augmentation de pics inconnus) peuvent bloquer le procédé de fabrication ou la libération de lots.

Figure 1 : Schéma du cycle de vie d’une méthode chromatographique

Etapes nécessitant une information sur la masse moléculaire exacte

Nous recherchions un instrument avec la capacité à répondre dans un court délai sans faire appel à une structure de laboratoire spécifique et complexe. Nous avons acquis un system UHPLC couplé à la spectrométrie haute résolution nommé ACQUITY Rda de chez Waters qui répond parfaitement à cet objectif. Ce détecteur est un spectromètre de masse à temps de vol.

Ensemble UNIFI-Acquity IClass-Acquity RDa (Waters)

L’utilisation au laboratoire de cet ensemble est équivalente à une chromatographie à détection UV, avec les restrictions d’usages liés à la spectrométrie de masse. Ce détecteur permet d’atteindre la masse exacte (10-5 unité) donnant accès avec précision à la fois au profil isotopique et au profil de fragmentation en paramétrant l’énergie de la source.

Figure : Example de spectre de masse obtenu sur le détecteur Rda avec proposition de fragmentation

Le logiciel de traitement des données UNIFI spécifique à l’analyse des spectromètres de masse à haute résolution permet une analyse spectrale précise avec tous les outils nécessaires (étude de la fragmentation, proposition de formules brutes, de formules développées …).

L’automatisation (Smart MS) des réglages et de la calibration de ce détecteur rend ce système UHPLC/MS haute résolution accessible à tous moments, cette nouvelle plateforme ne nécessitant aucune installation particulière, est complémentaire aux plateformes de développement et répond aux exigences de l’aQbD.

Nous avons testé pour vous la nouvelle version de Fusion QbD (9.9.0)

La version 9.9.0 est désormais disponible. Les tests que nous avons pu mener depuis quelques semaines sur une version pré-release ont très largement confirmé l’intérêt des nouvelles fonctionnalités.
Pour mémoire :
Peak Tracker™ permet, comme son nom l’indique, de suivre les pics inconnus lors des changements des conditions d’élution. La puissance et la rapidité de prise en main de cette fonction sont remarquables.
On notera deux points de vigilance : la performance du Tracking dépend, bien sûr, de la qualité du signal masse obtenu et on observe une tendance à la saturation de la mémoire quand Nombre de pics x Nombre d’expériences dépasse 300 (S-Matrix travaille sur ce dernier point).
Rs-Map-Response est un outil intéressant de l’interface graphique qui permet de sélectionner rapidement le profil chromatographique et les conditions d’élution qui répondent à une performance moyenne de résolution.
On notera que la « résolution moyenne » n’est pas une réponse à partir de laquelle on peut calculer un optimum mais à partir de la quelle on peut repérer graphiquement un optimum qu’il est ensuite facile de vérifier expérimentalement.

Rs-Map-Response


Forced Deg Studies est une amélioration remarquable de la stratégie de réplication déjà disponible dans les versions précédentes. Comme son nom ne l’indique pas (!), elle permet d’obtenir la visualisation dynamique (qui s’adapte à la position dans le domaine expérimental) d’un chromatogramme composite regroupant des pics obtenus sur les injections (dans les mêmes conditions) d’échantillons différents.
L’application la plus évidente est celle d’une étude de dégradation forcée (échantillon acide, échantillon alcalin…) mais le champ est très large (étude de plusieurs formulations, de modifications de procédés…)

Nous restons à votre disposition pour échanger sur le sujet…