La caractérisation des protéines reste toujours difficile et ne peut être obtenue que par l’utilisation d’un faisceau de méthodes d’analyses. Ce point est encore plus critique pour les protéines issues des biotechnologie et destinées à être commercialisées. La focalisation isoélectrique capillaire (cIEF), qui est une méthode d’électrophorèse capillaire, peut contribuer efficacement à cette caractérisation. Elle apporte une information sur la répartition des charges.
En cIEF, la séparation se déroule en deux étapes: la focalisation et la migration.
- Pendant la focalisation, il se forme un gradient de pH le long du capillaire dans lequel les protéines se distribuent selon leurs point isolélectrique (PI).
- Lors de la migration, les composés (marqueurs de PI et/ou protéines analysées) sont élués vers le détecteur.
La séparation électrophorétique se fait dans un capillaire inerte pour éviter l’adsorption de protéines et sans écoulement électro-osmotique (EOF).
Cette Technique de caractérisation permet d’obtenir un profil de PI et de détecter les modifications structurelles ayant un effet sur la répartition des charges.
Exemples de profils obtenus au laboratoire…
