Cet article s’inscrit dans la série des travaux d’évaluation des possibilités techniques de l’appareil de chromatographie en phase supercritique ou SFC (Supercritical Fluid Chromatography) UPC²™ (Waters). Nous présentons ici les résultats obtenus sur le Lipiodol®, spécialité pharmaceutique commercialisée par les laboratoires Guerbet.

Le Lipiodol® est un mélange complexe d’acides gras (obtenus à partir d’huile d’œillette¹) iodés. Son utilisation en tant que produit de contraste pour la radiologie a débuté en 1921 avec les travaux de J.A. Sicard et J. Forestier qui découvrent la myélographie².
De nos jours, le Lipiodol® est plutôt utilisé en radiologie interventionnelle pour l’embolisation, en chimio-embolisation lipiodolée et pour l’opacification du foie en scanner. C’est actuellement la seule huile iodée injectable disponible sur le marché.

Nous avons développé une méthode en étudiant le greffage de la colonne (Silice, Ethylpyridine et Fluorophényl),  la nature du co-solvant (acétonitrile ou méthanol), le gradient de phase mobile (co-solvant/CO₂) et la température de colonne sur la base d’un plan d’expérience définit à partir du logiciel d’optimisation Fusion™ (S-Matrix®).

Compte tenu de la complexité du produit étudié, nous avons cherché à évaluer la capacité de la technique à séparer un grand nombre de composés (ou capacité de pics).
Nous nous sommes donc attachés à sélectionner les conditions opératoires conduisant au plus grand nombre de pics (unique paramètre étudié).

La méthode retenue à l’issue de l’optimisation (phase silice et co solvant acétonitrile) permet de séparer 33 composés en 5 minutes avec une résolution supérieure ou égale à 1.

Sur ces bases, la capacité de pics qui est définie comme le nombre maximal de pics pouvant être séparés avec une résolution donnée (ici 1.0) dans des conditions opératoires fixées peut être estimée à partir de l’expression³ :

N le nombre plateaux théoriques calculés à partir des derniers pics du chromatogramme,
R_s la résolution minimum souhaitée,
k’₁ et k’_n les facteurs de capacité des premiers et dernier pics respectivement.

Soit en prenant R_s = 1 et k’₁= 0, k’_n le facteur de capacité d’un pic qui sortirait en fin de gradient (à 5 minutes) et N= 133286 (efficacité moyenne sur les 8 derniers pics) :

La capacité de pics de la colonne dans ces conditions est donc estimée à 270.

En pratique, dans le cas de mélange complexes, on évalue le nombre maximal de pics pouvant être résolus à 30% de la capacité. Soit, dans notre cas, 80 pics.

Cela démontre la puissance potentielle de la méthode. On pourrait ainsi imaginer une analyse de différents lots de Lipiodol® en vue d’établir une bibliothèque avec un profil spécifique à chaque lot.