Nous avons évalué l’intérêt de l’UHPLC pour l’analyse d’un oligosaccharide thérapeutique (C95H143N11O59S8Na8 – Mw = 2823 g/mol) par rapport à l’analyse de cette même molécule en HPLC.
L’échantillon est constiuté d’une solution d’oligosaccharide à 0.5 mg/ml.
L’analyse HPLC est réalisée sur une colonne Zorbax™ Poroshell 120 SB-C18 150 x 4.6 mm 2.7 µm (Agilent) – Détection UV 244 nm – Gradient d’élution Acétonitrile/Tampon sur 66 min.
L’analyse UHPLC a été réalisée sur une colonne Acquity™ BHE C18 50 x 2.1 mm 1.7 µm (Waters)- Détection UV 244nm – Gradient d’élution Acétonitrile/Tampon sur 10 min.
On constate immédiatement que l’analyse en UHPLC permet de réduire le temps de rétention d’un facteur 10 (3.7 versus 38 min) avec une largeur de pic diminuée et donc une efficacité améliorée (nombre de plateaux 138000 versus 2150). La hauteur de pic augmente également d’un facteur 9 ce qui conduit à une amélioration de la sensibilité du même ordre de grandeur.
Ces données établissent le grand intérêt de l’UHPLC pour l’analyse d’oligosaccharides thérapeutiques
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