Le risque d’obstruation des colonnes sub 2 µm UHPLC est plus important que celui des colonnes HPLC 
classiques avec des particules sub 3-5 µm. Cela est essentiellement lié au volume interstitiel plus petit des colonnes sub 2 µm, mais également à la porosité beaucoup plus faible du fritté de tête.
Dans une note technique, Phenomenex publie les résultats d’un test de protection par un dispositif SecurityGuard™. Le test porte sur le suivi de la contre pression d’une colonne Core-shell (2,6 µm Kinetex C18 50 x 4,6 mm) soumise à des séries d’injections d’une matrice biologique endogène (sans plus de précision…).
On peut tout d’abord regretter que le test n’est pas été réalisé sur une colonne sub 2 µm puisque ce sont ces colonnes qui sont les plus exposées aux risques d’obstruation!
Cependant, il est intéréssant de relever que, sans protection, l’augmentation de la contre-pression est constante et irréversible (ce qui peut conduire à une dégradation puis à une perte irréversible des performances de la colonne).
Avec la protection SecurityGuard ULTRA™, il y a toujours une augmentation de la pression mais en remplaçant cette protection à intervalles de temps régulier, la contre-pression retrouve son niveau initial.
SecurityGuard ULTRA™ que l’on peut assimiler à une colonne de garde permet donc de prolonger la durée de vie de la colonne et les performances de celle-ci.
Notre Expérience:
Nous avons l’expérience de l’utilisation de filtre en ligne KrudKatcher™ (Phenomenex) de faible porosité. Ces filtres sont à usage unique, sans possibilité réélle de nettoyage ou de régénération lors de la montée en pression.
Un filtre peut être utilisé pour 70 injections en moyenne, mais ce chiffre est trés variable (de 20 à 150) en fonction du type de matrice injectée. A raison de 45 € pièce, le coût de revient moyen est de 0,64 €/inj.
Nous utilisons également des pré-colonnes classique (Lichrocart™ Merck). Avec une pré-colonne (40€), nous réalisons en moyenne 150 injections, soit un coût de 0,27 €/inj (55% de moins qu’avec les filtres en ligne). Nous les utilisons avec tous types de matrice et les colonnes dépassent 1500 injections.
La protection SecurityGuard ULTRA™ est vendue 270 € les 3 cartouches et le support de cartouche 85 € pièce, ce qui rend le système de protection assez couteux (1 cartouche = 20 injections, soit 4,5 euros/inj) au regard du nombre d’injection et du prix d’une colonne (prix catalogue d’une colonne Kinetex 50×4,6 mm 2,6 µm : 496 €).